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川崎病患者淋巴细胞P53基因的检测及临床意义

易岂建　杨锡强　李成荣　王莉佳　张远维

　　为探讨急性期川崎病（KD）患者外周血淋巴细胞凋亡延迟的机理，我们采用斑点杂交（Dot-blot）和流式细胞仪（FCM）分别检测KD患者淋巴细胞P53基因mRNA及蛋白质表达水平。
　　P53质粒为美国华盛顿大学Dr.Riddle赠送，以14例住院KD病人为研究对象，实验用外周血淋巴细胞，设4组：①正常儿童对照组；②治疗前KD病人组；③患者静脉注射免疫球蛋白（IVIG）组；④体外IL-6 McAb刺激组。结果表明：1）正常对照DNA杂交浓度达50μg/μl时显蓝色，RNA杂交浓度需100～200μg/μl时显蓝色，随浓度上升，斑点蓝色加深，KD患者外周血单个核细胞（PBMC）经anti-CD3刺激体外培养后，RNA杂交浓度需500～1000μg/μl时方显蓝色，当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时，RNA杂交浓度达200μg/μl可显蓝色，与正常对照组比较，KD患者外周血淋巴细胞P53基因mRNA表达水平降低，当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时，淋巴细胞P53基因mRNA表达水平明显提高；2）急性期KD病人外周血淋巴细胞P53蛋白质表达阳性细胞百分率（9.81±2.17）较正常对照组（30.57±15.38）明显降低，差异显著（P＜0.001），当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时，P53蛋白阳性细胞百分率（分别为33.72±13.17和29.81±13.68）明显提高。P53是重要的抑癌基因，我们发现KD患者外周血淋巴细胞凋亡延迟，其机理可能与本病患者异常升高的IL-6有关。异常增高的IL-6对外周血淋巴细胞P53基因表达有抑制作用。据此推测，KD患者异常升高的IL-6通过抑制外周血淋巴细胞P53基因表达而导致淋巴细胞凋亡延迟，免疫耐受遭到破坏。

作者单位：易岂建　杨锡强　王莉佳　张远维　400014 重庆医科大学儿童医院
　　　　　李成荣　深圳市儿童医院

（收稿：1998-01-04　　修回：1999-01-27）

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